Святитель Митрофан родился в Риме в 208 году. Его отец и брат были епископами и состояли в родственной связи с римским императором Пробом.

Отец Митрофана, Дометий, несмотря на жестокое преследование его братом христиан, всей душой уверовал во Христа и переселился в Византию вместе с двумя сыновьями.

Епископ Византии Тит наставлял Дометия и его сыновей Проба и Митрофана в богоугодной жизни. Обучившись закону Господню, за свою пламенную веру и желание послужить Господу Дометий был рукоположен во пресвитера, а затем возведен на епископский престол. После смерти Дометия на византийскую архиерейскую кафедру был возведен его старший сын, преемником которого в 316 году стал Митрофан.

Прибыв однажды в Византию (будущий Константинополь), император Константин Великий был восхищен красотой и удобным расположением города. Здесь он познакомился со святителем Митрофаном; увидев святость его жизни, император пригласил епископа в Рим. Вскоре Константин Великий перенес столицу из Рима в Византию и перевел туда святителя Митрофана.

В 325 году для низложения арианской ереси в Никее собрался I Вселенский Собор. На нем Константин Великий исходатайствовал у Отцов Церкви для святителя Митрофана, к тому времени уже глубокого старца, титул Патриарха.

За свои духовные труды патриарх Митрофан был награжден Господом даром прозорливости - он предсказывал будущее.

За десять дней до смерти свт. Митрофану был открыт день его кончины, и он мирно преставился ко Господу в 326 году в возрасте 117 лет. В Константинополе (ныне Стамбуле) в его память был воздвигнут храм, где и покоятся его святые мощи.